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兩種從固相樹脂上切除多肽的方法-多肽定制-多肽合成公司-正肽生化科技(南京)有限公司
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兩種從固相樹脂上切除多肽的方法

種從固相樹脂上切除多肽的方法
固相Fmoc化學(xué)合成多肽后,切割的方法有很多,現(xiàn)在介紹兩種我們大家常用的基本類型。 
1、強(qiáng)酸法(常用TFA)
       將干樹脂放在一個(gè)搖瓶中,加入適當(dāng)量的含清除劑(Scavengers)切割試劑三氟乙酸(TFA),10-25ml/g樹脂,蓋上蓋子,在室溫下進(jìn)行間歇式旋轉(zhuǎn)震蕩。抽濾樹脂,以新的TFA清洗樹脂2-3次,合并濾液,滴加8-10倍體積的冰乙醚。有時(shí)可以蒸掉部分TFA得到粗肽沉淀。乙醚可以用冰輔助降溫來提高沉淀效率。最后,收集下沉淀出來的多肽粗品。
    適用樹脂:王樹脂或Rink Amide樹脂
 
2、弱酸法(稀釋的TFA或醋酸)
1% TFA:
將1g 掛有多肽的樹脂加入盛有含1%TFA的二氯甲烷溶液玻璃搖瓶,密封后震蕩2分鐘,用氮?dú)鈱V液壓入另一個(gè)新的盛有含10%吡啶的甲醇搖瓶中,重復(fù)上述操作10次。用30ml DCM, 30ml MeOH先后順序清洗殘留在樹脂上的保護(hù)多肽三次。以TLC或者HPLC檢查清洗殘留情況。合并所有濾液,并減壓蒸掉溶劑剩5%體積。加40ml水,并用冰冷卻混合物去輔助沉淀。過濾后,用清水清洗產(chǎn)品3次,放在真空干燥箱內(nèi)用KOH或者P2O5進(jìn)行干燥。
稀醋酸:
用AcOH/TFE/DCM(2:2:6)的切割液處理掛在樹脂上的多肽2小時(shí),過濾樹脂,并用切割液洗滌樹脂三次?;旌蠟V液加入15倍體積的正己烷,旋蒸去除多余醋酸。多肽的回收方法詳見下文。
適用樹脂:2-CTC樹脂
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